Le plan de l'analyse cytologique

Une cellule est définie selon un grand nombre de critères qu'il faut observer avec attention pour réaliser une bonne identification.
Il passe par une étude approfondie :

  1. de l'aspect général
  2. du noyau
  3. du cytoplasme

1 - L'aspect général

La taille et la forme de la cellule constituent les deux critères qui définissent l'aspect général d'une cellule.
Ils sont fortement dépendants de la zone d'observation.
En début de frottis, les cellules sont un peu tassées les unes aux autres. Elles seront plus petites et sans forme précise.
Par contre, en fin de frottis, les forces d'étalement sont maximum et les cellules y seront plus grandes et déformées.
Il faut donc être vigilant et prendre ces deux critères avec beaucoup de prudence.

Il n'est généralement pas indispensable de connaître avec précision la taille des cellules sanguines et médullaires. Une simple approximation par comparaison avec l'étalon interne que constitue le globule rouge est suffisante (en sachant choisir le globule rouge de référence et se rappelant qu'il fait environ 7 µm de diamètre (GR)).

Taille relative

Plaquette au maximum 0,5 GR
Petit lymphocyte (l) 1 à 1,5 GR

Grand lymphocyte (L)
1,5 à 2 GR

Polynucléaire basophile (PB)
environ 1,5 GR

Polynucléaire neutrophile (PN)
environ 2 GR

Polynucléaire éosinophile (PE)
environ 2 GR

Monocyte (M)
environ 2 à 3 GR

Taille absolue

Il faut utiliser le dispositif suivant pour un microscope donné : un oculaire gradué, une échelle réelle portée par une lame de verre (micromètre objectif).
L'échelle graduée contenue dans un oculaire gradué est étalonnée à l’aide du micromètre objectif placé sur la platine du microsocpe et mis au point.
Il faut faire coincider les deux échelles sur un maximum de graduations et ensuite calculer la valeur en µm d'un intervalle entre deux graduations oculaires qui servira à mesurer les objets.
Cet étalonnage est réalisé pour chacun des objectifs : x 10, x 40 et x 100.
Les résultats obtenus resteront toujours valables pour le matériel utilisé (microscope – oculaire gradué – objectifs).

Oculaire gradué

Micromètre objectif

Echelles aux grossissements x 100 et x 400


Les cellules sont généralement de forme arrondie ou ovalaire. Certaines, peuvent adhérer aux cellules voisines et ainsi être sans forme bien précise.


2 - Le noyau

C'est un élément fondamental des cellules nucléées car il contient l'information génétique. Il est présent, de façon plus ou moins importante, dans toutes les cellules sanguines sauf les globules rouges et les plaquettes.
La majorité des cellules possèdent un seul noyau dont la forme et la position dans la cellule sont des critères qui la caractérisent.
Les cellules sanguines ne se divisent plus contrairement à leurs précurseurs médullaires. L'aspect de la chromatine, condensation des nucléoprotéines en interphase, va être étudiée en détail car elle signe l'état fonctionnel des cellules.

Elle peut être diversement exprimée : en pourcentage ou en rapport N/P (N pour noyau et P pour protoplasme, l'ancien nom du cytoplasme).
L'estimation est très approximative et le résultat lié à la qualité du frottis et à la zone d'observation.
C'est le choix du rapport N/P qui est fait ici. Il permet d'évaluer l'importance du noyau dans la cellule et de faire la différence entre

  • - les cellules à gros noyau avec donc peu de cytoplasme visible : N/P >> 1,
  • - celles possédant un noyau important laissant voir une zone de cytoplasme appréciable : N/P > 1,
  • - celles, enfin, ayant un noyau d'importance moyenne et occupant la moitié des surfaces visibles de la cellule : N/P = 1.

Rapport N/P >> 1
Petit lymphocyte

Rapport N/P > 1
Polynucléaire basophile

Rapport N/P >= 1
Grand lymphocyte

Rapport N/P = 1
Polynucléaire neutrophile

Rapport N/P = 1
Polynucléaire éosinophile

Rapport N/P <= 1
Monocyte

  • Position
    Elle est majoritairement centrale mais le noyau peut toucher le(s) bord(s) de la cellule voire se mettre en drapeau (aspect de bandes alternées : cytoplasme - noyau - cytoplasme).
  • Forme
    Elle est, en général, ronde ou ovalaire pour les éléments à chromatine dense ou moyennement condensée.
    Mais elle peut être déformée chez les éléments à chromatine légère.
    Il faut noter le cas particulier des polynucléaires qui ont un noyau lobé de 2 à 5-6 lobes correspondant à l'âge des cellules.
    Ces lobes peuvent être allongés plus ou moins renflés (PN et PE) ou même arrondis (PB)

Noyau rond
Petit lymphocyte

Noyau ovalaire
Grand lymphocyte

Noyau en drapeau
Grand lymphocyte

Noyau déformé
Monocyte

Noyau à lobes ronds
Polynucléaire Basophile

Noyau à lobes allongés et renflés
Polynucléaire éosinophile

Noyau à deux lobes allongés
Polynucléaire neutrophile

Noyau à trois lobes allongés
Polynucléaire neutrophile

Noyau à quatre lobes allongés
Polynucléaire neutrophile

Noyau à cinq lobes allongés
Polynucléaire neutrophile

Noyau à six lobes allongés
Polynucléaire neutrophile

Elle est fonction de l'activation cellulaire.
Plus une cellule est en fin d'évolution ou en repos et plus elle sera condensée.
A l'inverse, plus une cellule est jeune ou active, plus elle sera légère avec présence de zones ovalaires bleutées, appelées nucléoles et correspondant à un lieu de condensation d'ARN.
Les différentes textures possibles vont de l'aspect de :

  • mottes, zones de condensation, de taille plus ou moins grande, de forme arrondie ou allongée, de couleur violette plus ou moins sombre,
  • fibres enchevêtrées,
  • réseau finement granuleux.

dense à mottes moyennes et rondes
Plasmocyte (en bas à gauche)

dense à petites mottes rondes
Erythroblastes acidophile et polychromatophile

dense à mottes allongées
Polynucléaire

légère à mottes moyennes et rondes
Grand lymphocyte

légère et filamenteuse
Monocyte

en réseau finement granuleux à nucléoles
Proérythroblaste


3 - Le cytoplasme

Il s'agit enfin de définir l'affinité du cytoplasme et d'y rechercher la présence de granulations, d'en préciser le nombre, la répartition, la taille et l'affinité.

Deux affinités sont possibles :

  • acidophile : cytoplasme des polynucléaires et des hématies
  • basophile avec des teintes
    • - soutenues chez le plasmocyte, le petit lymphocyte et les cellules immatures
    • - moins soutenues pour le grand lymphocyte, le monocyte et les plaquettes.

acidophile clair
Polynucléaires

basophile clair
Grand lymphocyte et plaquettes

basophile soutenu
Erythroblastes basophiles

Il existe plusieurs critères attachés aux granulations :

  • Existence
    • - absentes des cytoplasmes des cellules de la lignée érythrocytaire normale (précurseurs et globule rouge), du petit lymphocyte et du plasmocyte
    • - présentes dans les cytoplasmes des cellules des lignées granulocytaires, monocytaires et thrombocytaires
  • Nombre et localisation
    • - rares et regroupées pour les grands lymphocytes (voire absentes)
    • - peu nombreuses pour le polynucléaire basophile
    • - nombreuses voire très nombreuses et dispersées pour les autres cellules
  • Taille
    • - assez grosse pour les polynucléaires éosinophiles et basophiles
    • - moyenne pour les grands lymphocytes et les plaquettes
    • - fine et irrégulière les polynucléaires neutrophiles
    • - très fine (en poussière) pour les monocytes
  • Affinité
    • - acidophile : granulations des polynucléaires éosinophiles
    • - basophile : granulations bleues noires du polynucléaire basophile
    • - neutrophile : granulations violettes du polynucléaire neutrophile
    • - azurophile : granulations des grand lymphocyte, monocyte et des plaquettes

nombreuses, assez grosses
dispersées et acidophiles

pour le polynucléaire éosinophile

peu nombreuses, grosses
dispersées et basophiles

pour le polynucléaire basophile

très nombreuses, fines
dispersées et neutrophiles

pour le polynucléaire neutrophile

peu nombreuses, assez grosses
regroupées et azurophiles

pour le grand lymphocyte

très nombreuses, très fines
dispersées et azurophiles

pour le monocyte