Les grossissements utilisés en microscopie photonique

1 - Le grossissement x 100

Ce faible grossissement permet :

L'étalement d'une goutte de sang ou de moelle sur une lame de verre permet d'obtenir une couche unicellulaire ; cependant, selon les zones observées, les cellules seront :

tassées les unes sur les autres, en rouleau
en début du frottis

déformées et étirées
en fin de frottis

correctement étalées
en général dans le tiers médian

Ne pas oublier que le parcours de l'ensemble du frottis est indispensable à la réalisation de la formule leucocytaire et à la recherche d'éléments rares.
Pour le myélogramme, il faudra rechercher des zones réparties sur toute la surface de l'étalement où les cellules sont identifiables.

Estimation de la leucocytose sur un frottis sanguin

Nombre de leucocytes à 6 G/l

Nombre de leucocytes à 8 G/l


Estimation de la richesse en cellules nucléées d'un frottis de moelle osseuse

Elle est approximative mais elle constitue la seule "valeur absolue" (comme le dénombrement des leucocytes en G/L dans le sang).
C'est un élément à prendre en compte lors de l'interprétation du myélogramme.
Elle se réalise au grossissement x 100 par évaluation de la population nucléée (en référence, la richesse d'un sang normal est de richesse +) et le résultat s'exprime en +

Richesse 0
Moelle aplasique

Richesse +
Moelle pauvre

Richesse ++
Moelle de richesse normale

Richesse +++
Moelle de richesse normale

Richesse ++++
Moelle de richesse augmentée

Eléments normaux de la lignée des plaquettes
La lignée mégacaryocytaire est la troisième lignée cellulaire. Les mégacaryocytes sont des cellules de grande taille, peu représentées et mal réparties sur le frottis d'où la difficulté de les inclure dans le myélogramme en %. Il convient donc de les dénombrer au petit grossissement (x 100) et de rendre le résultat en + comme pour la richesse cellulaire. Le nombre observé dépend évidemment de l'épaisseur et de la grandeur du frottis. Il faut également observer les différents stades présents afin de voir s'il n'y a pas de blocage de maturation.

Richesse +
Moelle pauvre en mégacaryocytes

Richesse ++
Moelle de richesse normale en mégacaryocytes

Richesse +++
Moelle de richesse normale en mégacaryocytes

Richesse ++++
Moelle de richesse augmentée en mégacaryocytes


Eléments anormaux du sang
Il est possible de repérer, au petit grossissement, des éléments anormaux de grande taille comme des microfilaires. Ces embryons de filaires, nématodes vivant dans le système lymphatique et dans les tissus, passent, pour certaines espèces, dans le sang.
Ils sont à rechercher impérativement en cas de contexte évocateur comme un séjour en zone d'endémie et une hyperéosinophilie.

Microfilaire Loa Loa sur un bord de frottis



Cliquer sur l'image pour passer au grossissement x 1000

Microfilaire Loa Loa en bout de frottis



Cliquer sur l'image pour passer au grossissement x 1000


Placards de cellules atypiques
Il est parfois possible de repérer à l'observation d'un frottis de moelle osseuse au petit grossissement des cellules dystrophiques d'aspect très indifférencié (grande taille, grand rapport nucléocytoplasmique et chromatine légère et nucléolée) associées en amas ("placard") qui sont souvent les métastases de cancers.
La caractérisation de ces cellules se fera à l'aide de marqueurs spécifiques.



Cliquer sur l'image pour passer au grossissement x 1000



Cliquer sur l'image pour passer au grossissement x 1000


2 - Le grossissement x 1000

Ce plus fort grossissement est obtenu avec un objectif à l'immersion.
La goutte d'huile déposée sur la préparation modifie l'indice de réfraction du milieu où passe la lumière.
Cela permet d'augmenter la luminosité. Il est indispensable également de relever le condenseur vers la préparation.
Ces deux interventions sont nécessaires à une observation confortable.
Ce grossissement est indispensable à une identification correcte des cellules car seul, il permet de voir les détails discriminants comme les granulations ou la texture de la chromatine.