Description des grands lymphocytes hyperbasophiles

• Aspect général
  
  • - Taille : 18 à 31 µm
  • - Forme : ovalaire
• Noyau
  
  • - Taille : NP = 1
  • - Forme : globalement ovalaire
  • - Chromatine : légère à peu condensée et nucléolée
• Cytoplasme
  
  • - Affinité : basophile soutenu (hyperbasophile)
  • - Sans granulations (ou exceptionnelles)

• Forte hyperleucocytose avec myélémie à pyramide de maturation conservée sur frottis sanguin et légère érythroblastose
• Déséquilibre des lignées médullaires (lignée granuleuse envahissante avec maturation conservée) dans une moelle de richesse augmentée (++++)

• Acutisation quasi systématique (transformation en leucémie aiguë avec blocage de maturation des cellules jeunes) précédée d'un épisode d'hyperbasophilie (augmentation des granulocytes basophiles)

• Hyperleucocytose modérée avec myélémie et signes, sur frottis sanguin, de dysérythropoïèse avec hématies en poires et érythroblastose
• Fibrose progressive de la moelle osseuse rouge

Deux granulocytes neutrophiles: en haut classe 3 et en bas classe 0

Cette enzyme, présente dans les granulations des granulocytes (polynucléaires) neutrophiles, peut être mise en évidence au laboratoire par catalyse, à pH alcalin, de la libération de naphtol à partir d'un substrat comme le phosphate de naphtol. Le naphtol est ensuite précipité en un produit coloré par un sel de diazonium.
La technique consiste, après coloration, à observer, au microscope, la positivité de 100 granulocytes neutrophiles (PN) en les classant de 0 à 4 selon le nombre et la grosseur des grains observés dans le cytoplasme. Le score final est établi en multipliant le nombre trouvé par niveau par le nombre de la classe (0 à 4) et en additionnant les produits. Les valeurs de référence ainsi que la définition des classes sont fournis par le fabricant des réactifs.
Dans le cadre de la LMC, les granulocytes issus du clone malin ne possèdent pas cette enzyme ce qui explique le score effondré (sauf en cas d'infections où il y a stimulation des granulocytes normaux) à l'inverse des granulocytes proliférant dans l'SMC.

Présence du chromosome Philadelphie au caryotype

Les cellules bloquées en métaphase peuvent être éclatées et colorées. Le classement des chromosomes peut mettre en évidence un chromosome 22 raccourci (Ph1) au profit d'un 9 plus long. Il s'agit d'une translocation 22-9 spécifique de la LMC.

Mise en évidence du gène ABR BCL

Des techniques d'hybridation in situ ou de biologie moléculaire peuvent identifier sur les cellules cancéreuses ce gène anormal combinaison d'une partie du gène BCR (breakpoint cluster region) du chromosome 22 avec une partie du gène ABL (Abelson) du chromosome 9.
La protéine qui est produite par ce gène BCR-ABL est responsable de la gravité de la maladie.

Elle peut être décidée dans le cas de la SMC pour mettre en évidence de la fibrose médullaire. Le tissu médullaire est pauvre en cellules et les fibres de réticuline envahissent l'espace.
Consécutivement, la métaplasie splénique peut être mesurée par exploration isotopique.

Imprégnation argentique d'une coupe de biopsie de moelle osseuse rouge

Envahissement sanguin

• Nombreux lymphocytes (petits ou grands) sur frottis sanguin avec de nombreuses ombres de Gumprecht

Infiltration médullaire

• Nombreux lymphocytes médullaires (les mêmes que dans le sang)

• Rouleaux d'hématies sur frottis sanguin liés à l'augmentation des protéines (gamma globulines monoclonales)

Infiltration médullaire

• Plasmocytes dystrophiques médullaires (de grande taille, vacuolisés et parfois très jeunes)

Mise en évidence de la monoclonalité de la sécrétion plasmocytaire maligne avec type d'immunoglobuline en cause (type de chaînes lourdes ou légères).

• Cellules de grande taille (environ 50 μm) caractérisées par un noyau volumineux bi- ou polylobé, la présence d’un nucléole volumineux et un cytoplasme basophile.

Blastes de LAM1 (sang et moelle)

• de taille moyenne 15 à 20 µm
• à rapport N/P >>1
• à chromatine légère et nucléolée
• à cytoplasme basophile avec parfois quelques granulations ou corps d'Auer
• cytochimie + pour la MPO

Blastes de LAM2 (sang et moelle)

• de taille 15 à 20 µm
• à rapport N/P >>1
• à chromatine légère et nucléolée
• à cytoplasme basophile avec des granulations azurophiles et/ou parfois des corps d'Auer
• cytochimie + pour la MPO

Blastes de LAM3 (sang et moelle)

• de taille 18 à 25 µm
• noyau généralement dysmorphique à rapport N/P >1
• à chromatine légère et nucléolée
• à cytoplasme basophile avec de très nombreuses granulations azurophiles et parfois des corps d'Auer en fagot
• cytochimie ++ pour la MPO

Blastes de LAM5 (sang)

• de taille 18 à 25 µm
• noyau généralement dysmorphique à rapport N/P = 1
• à chromatine légère, filamenteuse et nucléolée
• à cytoplasme basophile clair avec parfois des fines granulations azurophiles
• cytochimie :
  • - MPO (myéloperoxydase) + ou +/-
  • - NASDA-estérase (Naphtol ASD Acétate) + inhibées par le fluorure de sodium

Blastes (moelle)

• grande taille > 20 µm
• rapport N/P > 1
• à chromatine légère et nucléolée
• à cytoplasme basophile clair
• cytochimie : myéloperoxydase + ou +/-

Présence d'une lignée érythroblastique importante

Lymphoblastes des LAL (sang et moelle)

• taille homogène pour un même sang (ou moelle):
  • - soit de petite taille (10 à 15 µm)
  • - soit de grande taille (15 à 20 µm)
• noyau à rapport N/P > voire >> 1
• à chromatine légère et nucléolée
• cytoplasme basophile clair sans granulations

Cette technique permet de mettre en évidence des anomalies chromosomiques dans certaines LAL de type B.

Cet examen conduit à l'identification des marqueurs membranaires, en particulier les CD (Cluster of Differentiation)

• qui marquent l'évolution des cellules et permettent ainsi de mieux situer le blocage de maturation,
• qui sont caractéristiques des lymphocytes B ou des lymphocytes T.