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Les protozoaires tissulaires et des muqueuses

  1. - Analyse cytologique des formes parasitaires
    L'analyse cytologique des éléments parasitaires repérés lors du parcours systématique de la préparation (frottis ou coupe fixée et colorée) répond à de nombreux critères qu'il faut décliner avec méthode pour une identification rigoureuse.
    2. Les protozoaires tissulaires et des muqueuses appartiennent à plusieurs embranchements (classification 2013) :
  2. - Flagellata (Flagellés)
  3. - Apicomplexa ou Sporozoa (Sporozoaires)

1 - L'analyse cytologique des formes parasitaires des protozoaires tissulaires et des muqueuses

Plan d’étude des flagellés

Cette étude aura lieu aux grossissements x 1000 sur des frottis fixés et colorés.

Taille

Estimée en µm, en général de 3 à 40 µm.

Forme

En général arrondie, ovalaire ou fusiforme.

Noyaux

Nombre et aspect.

Cytoplasme

Coloration et contenu.

Flagelles

Nombre et position.

Plan d’étude des différents stades des Plasmodium en vue d’un diagnostic d’espèce

Cette étude aura lieu au grossissement x 1000 sur un frottis mince réalisé sur un sang frais (moins d’une ½ heure de contact avec un anticoagulant) coloré au May Grünwald Giemsa. L’examen minutieux des hématies hôtes des parasites est indispensable pour un diagnostic d’espèce et donc exclut l’utilisation de la technique de la goutte épaisse dans ce but.
L’étude se fera avec rigueur selon plusieurs critères :

Richesse parasitaire

Les plus fortes richesses sont constatées lors d’une infection par P. falciparum.
P. vivax et P. ovale sont d’une richesse moyenne.
Quant à P. malariae, la densité parasitaire est plutôt pauvre.

Variété des formes parasitaires

L'aspect est monotone pour P. falciparum : trophozoïtes et/ou gamétocytes.
Les lames sont bigarrées pour les autres variétés avec tous les stades représentés : trophozoïte, schizonte jeune, schizonte mûr et gamétocyte.

Etude des différents stades

2 - Embranchement des Flagellata (Flagellés)

Les principaux parasites flagellés présents au niveau des tissus et muqueuses de l'homme sont Trichomonas vaginalis, Trypanosoma, Leishmania...

Trichomonas vaginalis

Dans le genre Trichomonas, se trouvent plusieurs espèces avec chacune leur spécificité de tissu et des caractéristiques cytologiques différentes :
- Trichomonas intestinalis au niveau des muqueuses intestinales
- Trichomonas tenax au niveau des muqueuses bucales
- Trichomonas vaginalis au niveau des muqueses urogénitales.

La transmission de ce flagellé se fait par contact direct car, le parasite ne s'enkystant pas, est fragile en dehors du contexte de l'hôte. Le plus souvent repéré à l'état frais grâce à leur nage frétillante, ces parasites perdent certaines de leur caractéristique après coloration du fait de leur mauvaise conservation.

Trophozoïte deTrichomonas vaginalis

- Taille de 10 à 20 µm,
- Forme globuleuse avec une membrane ondulante sur le 1/3 de la longueur,
- Éléments de mobilité : 5 flagelles dont l'un sous tend la membrane ondulante,
- Contenu : un gros noyau ovalaire et un axostyle tous deux de coloration azurophile dans un cytoplasme bleu.

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Trypanosoma

Trypasoma est un flagellé se multipliant dans les liquides extracellulaires (plasma, lymphe ganglionnaire et LCR en phase terminale) et provoquant selon les espèces en cause des affections graves :
- T. gambiense et T. rhodesiense, agents de la maladie du sommeil africaine ayant pour vecteur un insecte diptère du genre Glossina ( mouche Tsé-Tsé),
- T. cruzi, agent de la maladie de Chagas sud américaine ayant pour vecteur un insecte de la famille des réduvidés (punaises).

Aspect morphologique pour T. gambiense et T. rhodesiense

- Taille de 10 à 40 µm,
- Forme en fuseau possédant une membrane ondulante,
- Éléments de mobilité : 1 flagelle qui sous tend la membrane ondulante,
- Contenu : cytoplasme bleu avec un noyau central rouge et le kinétoplaste point d'insertion du flagelle récurrent.

Remarque : Pour T. cruzi, des formes amastigotes peuvent être présentes dans les muscles et les macrophages en cours de maladie.

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Leismania

Leismania est un flagellé provoquant selon les espèces en cause des affections cutanées (Bouton d'Orient), muqueuses ou viscérales (Kala Azar) graves. Les hôtes intermédiaires sont des phlébotomes, petits insectes.
Ces protozoaires se multiplient dans les cellules macrophagiques de l'homme.

Aspect morphologique de la forme amastigote de Leismania dans les cellules de l'homme et des vertébrés

- Taille de 3 à 5 µm,
- Forme arrondie, immobile,
- Contenu : cytoplasme bleu avec un noyau et les éléments locomoteurs emprisonnés azurophiles.

Aspect morphologique de la forme promastigote de Leismania chez le phlébotome et en culture

- Taille de 8 à 20 µm de longueur,
- Forme de fuseau avec un flagelle,
- Contenu : cytoplasme bleu avec un noyau et l'organite d'insertion du flagelle (blépharoplaste) azurophiles.

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2 - Embranchement des Apicomplexa (Sporozoaires)

Parmi ces parasites, peuvent être remarqués les agents
- du paludisme : Plasmodium,
- de la pyroplasmose : Babesia,
- de la toxoplasmose : Toxoplasma gondii.

Plasmodium

Quatre espèces parasitent l'homme :
- Plasmodium falciparum
- Plasmodium vivax
- Plasmodium ovale
- Plasmodium malariae.
Seule l'espèce Plasmodium falciparum est mortelle par neuropaludisme.
Le vecteur est un moustique femelle du genre Anopheles. C'est lui qui, en aspirant le sang d'un individu hébergeant des formes circulantes gamétocytes et en réinjectant avec sa salive les formes infestantes sporozoïtes après leur maturation, transmet la maladie aux individus non atteints.


Plasmodium falciparum

Sous forme mérozoïte, il entre par effraction dans des hématies matures (de taille normale).
Il ne provoque pas de granulations ou rarement des taches de Maurer (dégradation de l'hémoglobine donnant un aspect en coups d'ongle gris bleuté chez le trophozoïte évolué).
Il donne des frottis de densité parasitaire élevée mais très monotones car les stades retrouvés sont uniquement :
- le trophozoïte
- et/ou le gamétocyte
En effet, les schizontes ne sont présents que dans les capillaires profonds.

Trophozoïte

Aspect en anneau classiquement décrit en "bague à chaton"
- Taille : 2 µm
- Forme : globulaire
- Contenu : une vacuole centrale non colorable repoussant en périphérie le noyau rond rouge violacé
- Cytoplasme bleuté

Remarque : le globule rouge peut être pluriparasité.

Gamétocyte

- Taille : 10 µm (de longueur)
- Forme : en banane ou en croissant
- Contenu : un noyau arrondi rouge violacé et central, un cytoplasme bleu ou rose dans lequel se trouvent de nombreux grains de pigment palustre noir

Remarque : le parasite déforme l'hématie parasitée souvent difficilement visible car très décolorée par deshémoglobinisation.

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Plasmodium vivax

Plasmodium vivax entre par effraction dans des hématies jeunes (de taille plus élevée).
Suite au développement du parasite, ces globules rouges se remplissent de granulations de Schüffner (dégradation de l'hémoglobine donnant un pointillé rouge).
La richesse parasitaire est en général élevée.
Tous les stades sont retrouvés.

Trophozoïte

- Taille : 2 µm
- Forme : globulaire
- Contenu : une vacuole centrale non colorable repoussant en périphérie le noyau rond rouge violacé
- Cytoplasme bleuté
Lors de l'évolution, le trophozoïte mûr montre une taille augmentée de 5 à 7 µm pour un parasite déformé et apparition dans le globule rouge de granulations azurophiles de Schüffner.

Schizonte

- Taille : jusqu'à 6 µm (90 % du globule rouge)
- Forme : arrondie ou ovalaire
- Contenu : multiplication des formes parasitaires, donc 4 à 8 noyaux rouges violacés dans un cytoplasme bleuté au centre duquel apparaît le pigment palustre noir
- Cytoplasme bleuté
Pour le schizonte mûr ou corps en rosace, il y a un maximum de 16 futurs mérozoïtes qui tendent à s'individualiser avec permanence des granulations de Schüffner.

Gamétocyte

- Taille : jusqu'à 6 µm (90 % du globule rouge)
- Forme : arrondie ou ovalaire
- Contenu : un gros noyau ovalaire et souvent déformé rouge violacé dans un cytoplasme bleu ou rose dans lequel se trouvent de très nombreux grains de pigment palustre noir

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Plasmodium ovale

Plasmodium ovale entre par effraction dans des hématies qu'il ovalise et qui se rempliront de granulations de Schüffner (dégradation de l'hémoglobine donnant un pointillé rouge).
La richesse parasitaire est en général moyenne.
Tous les stades sont retrouvés.

Trophozoïte

- Taille : 2 à 3 µm
- Forme : globulaire
- Contenu : une vacuole centrale non colorable repoussant en périphérie le noyau rond rouge violacé
- Cytoplasme bleuté
Lors de l'évolution, le trophozoïte mûr montre une taille augmentée de 5 à 7 µm pour un parasite déformé et apparition dans le globule rouge de granulations azurophiles de Schüffner.

Schizonte

- Taille : jusqu'à 6 µm (90 % du globule rouge)
- Forme : arrondie ou ovalaire
- Contenu : multiplication des formes parasitaires, 2 à 4 noyaux rouges violacés dans un cytoplasme bleuté au centre duquel apparaît le pigment palustre noir
- Cytoplasme bleuté
Pour le schizonte mûr, il y a un maximum de 8 futurs mérozoïtes qui tendent à s'individualiser avec permanence des granulations de Schüffner et modification de la forme de l'hématie parasitée : ovalisée et frangée.

Gamétocyte

- Taille : jusqu'à 6 µm (90 % du globule rouge)
- Forme : arrondie ou ovalaire
- Contenu : un gros noyau ovalaire et souvent déformé rouge violacé dans un cytoplasme bleu ou rose dans lequel se trouvent de très nombreux grains de pigment palustre noir
L'hématie parasitée est de forme ovale et frangée et contient des granulations de Schüffner

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Plasmodium malariae

Plasmodium malariae entre par effraction Plasmodium malariae entre par effraction dans des hématies âgées (de taille plus petite) sans granulations.
La richesse parasitaire est en général faible.
Tous les stades sont retrouvés.

Trophozoïte

- Taille : 2 µm
- Forme : globulaire
- Contenu : une vacuole centrale non colorable repoussant en périphérie le noyau rond rouge violacé
- Cytoplasme bleuté
Au cours de l'évolution, le parasite se déforme fréquemment sous forme d'une bande médiane, appelée "bande équatoriale" avec présence de quelques grains de pigment noir dans le globule rouge.

Schizonte

- Taille : jusqu'à 6 µm (totalité du globule rouge)
- Forme : arrondie ou ovalaire
- Contenu : multiplication des formes parasitaires, 2 à 4 noyaux rouges violacés dans un cytoplasme bleuté au centre duquel apparaît le pigment palustre noir
- Cytoplasme bleuté
Pour le schizonte mûr ou corps en marguerite avec disposition régulière des parasites en périphérie, il y a un maximum de 8 futurs mérozoïtes qui tendent à s'individualiser et permanence des grains de pigment palustre dans le globule rouge.

Gamétocyte

- Taille : jusqu'à 6 µm (totalité du globule rouge)
- Forme : arrondie
- Contenu : un gros noyau ovalaire et souvent déformé rouge violacé dans un cytoplasme bleu ou rose dans lequel se trouvent de très nombreux grains de pigment palustre noir

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Babesia

Ce protozoaire intraérythrocytaire peut exceptionnellement parasiter l'homme donnant une zoonose cosmopolite : la piroplasmose.
Cette maladie a comme vecteur la tique.

Trophozoïte

- Taille : 2 à 4 µm
- Forme : arrondie, ovalaire, en bâtonnet ou en raquette
- Contenu : un noyau visible, une vacuole mais pas de pigment
- Cytoplasme bleuté
Les hématies parasitées sont de taille normale et sans granulations.
Le diagnostic différentiel se pose essentiellement avec Plasmodium falciparum.
Il peut y avoir fréquemment plusieurs parasites par hématies.