Fiches techniques - Hem-image  
Étalement ou frottis sanguin
Principe
Obtenir sur une lame de verre une couche unicellulaire d'éléments figurés du sang répartis sur tout le frottis et fixés dans l'aspect le plus proche de leur état physiologique.
Technique
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Préparer le matériel nécessaire :
lames dégraissées référencées, pastette, spatule,
gants, sang*, conteneur pour déchets contaminés.

Prélever le sang à l'aide de la pastette après l'avoir homogénéisé.
   Déposer une petite goutte à l'une des extrémités de la lame.

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Positionner la spatule de façon à prendre la totalité de la goutte.
La laisser se répartir de façon homogène le long du biseau.

Appliquer un mouvement de translation horizontale en maintenant la spatule d’un angle de 45° environ sans appuyer tout au long de la lame.
Sécher par agitation pour fixer temporairement les cellules.
  Éliminer les déchets contaminés.

*afin que les cellules aient l’aspect le plus proche possible de leur état physiologique, il est bon que le délai de contact avec l’anticoagulant ne dépasse pas ½ heure car ensuite les cellules gonflent (macroplaquettes voire plaquettes géantes), certaines se vacuolisent (monocytes et grand lymphocytes) d’autres montrent des images de noyaux en picnose ; l’idéal serait de réaliser les frottis sur un sang recueilli sans anticoagulant (au bout du doigt ou sur les dernières gouttes de l’aiguille).

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Étalement ou frottis sanguin
Critères d’un bon frottis

de bonne taille (½ à ¾ de la lame)
de bonne densité
goutte étalée en entier
distant des bords de la lame donc accessible en tout point à l’observation microscopique

Causes d'erreurs

lames mal dégraissées  -> trous.
lames sales, poussiéreuses -> traînées

irrégularité du mouvement -> stries
appui sur la spatule -> stries et franges importantes

angle trop aigu -> frottis trop fin et/ou trop long avec franges

angle trop obtus -> frottis trop épais et/ou trop court

goutte non étalée  en entier -> frottis non représentatif du sang

arrêt du mouvement avant épuisement du sang ->  barre épaisse en bout de frottis